science >> Wetenschap >  >> Chemie

Chitine bevlekken

Een microbioloog gebruikt chitine-kleuring, zodat ze schimmels duidelijk onder de microscoop kan zien. Schimmels gebruiken chitine als structureel materiaal in hun celwanden, zodat de vlek de celwand goed laat zien. De lactofenol-katoenblauwe vlek is de meest voorkomende vlek voor schimmels. Het fenol doodt micro-organismen en voorkomt dat schimmel enzymen de cel afbreken. De katoenblauwe kleurstof maakt het chitine blauw. Chitinekleuring is een relatief eenvoudige procedure met goedkope materialen. U kunt uw eigen kleurstof maken of commercieel voorbereide vlekken kopen.

Bereid een oplossing van lactofenol-katoenblauw voor. Weeg 0,05 gram katoenblauwe kleurstof af met een gevoelige weegschaal. Meng de kleurstof met 20 milliliter gedestilleerd water in een reageerbuis en laat het een nacht staan.

Trek handschoenen aan voordat u de vlekbereiding de volgende dag afwerkt. Plaats 20 ml melkzuur in een bekerglas en meng het met 20 g fenolkristallen. Roer tot het mengsel is opgelost. Voeg 40 ml glycerol toe en mix. Vervolgens de katoenblauwe oplossing door een stuk filterpapier in het bekerglas tappen en grondig mengen.

U kunt ook een in de handel verkrijgbare bron van de vlek gebruiken. Bewaar de vlek op kamertemperatuur.

Label een microscoopglaasje met de naam of het nummer van de monsteridentificatie. Gebruik een steriele druppelaar om een ​​enkele druppel van een watermonster op het midden van de microscoopglaasje te plaatsen. Plaats voor een droog monster een enkele druppel alcoholoplossing van 70 procent op de dia en gebruik een steriele lus om het droge monster in de alcohol te mengen.

Gebruik een schone druppelaar om twee druppels lactophenol over te brengen katoenblauwe vlek op het midden van de dia. Als u 70 procent alcohol op de glaasje gebruikt, doe dit dan voordat de alcohol van de glaasje verdampt.

Raak een rand van de dekglaasje van de microscoop aan op één rand van het preparaat van het natte monster. Laat het slipje voorzichtig op de monsterbereiding vallen en zorg ervoor dat u geen luchtbellen onder de glijbaan opsluit. Het gekleurde monster is nu klaar voor onderzoek onder de microscoop.