De donkere fase van fotosynthese, ook wel bekend als de Calvin-cyclus, vereist eigenlijk geen duisternis. Het kan voorkomen in de aanwezigheid van licht, maar er wordt niet direct gebruik gemaakt van lichtenergie.

Dit zijn de grondstoffen die nodig zijn voor de donkere fase:

* Kooldioxide (CO2): Dit is de belangrijkste koolstofbron voor de opbouw van suikers.

* ATP: Dit is de energievaluta van de cel, geproduceerd tijdens de lichtafhankelijke reacties van fotosynthese.

* NADPH: Dit is een reductiemiddel, ook geproduceerd tijdens de lichtafhankelijke reacties, dat elektronen naar de Calvin-cyclus transporteert.

Dus hoewel de donkere fase geen rechtstreeks gebruik maakt van licht, is deze sterk afhankelijk van de producten van de lichtafhankelijke reacties.