Het isoleren van bacteriën uit de grond is een belangrijke eerste stap in veel microbiologische experimenten. Zodra ze geïsoleerd zijn, kunnen bacteriën verder worden geanalyseerd om dingen te bepalen, zoals hun soort en hun functie in de bodemomgeving. Zelfs een kleine hoeveelheid grond kan miljoenen bacteriën bevatten, waardoor het nodig is om een ​​grondmonster te verdunnen voordat bacteriën uit het monster worden geïsoleerd.

Meet 100 ml. gedistilleerd water in de maatcilinder en voeg het toe aan de steriele fles.

Weeg 1 g van het bodemmonster af en voeg het toe aan de fles gedistilleerd water. Sluit de fles stevig af en schud deze om de oplossing grondig te mengen.

Label de steriele reageerbuisjes "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," en "10 ^ - 6." Voeg met een van de pipetten 9 ml gedestilleerd water toe aan elk van de buizen.

Breng 1 ml van de oplossing in de fles over in de buis met het label "10 ^ -3", met een nieuwe pipet. Sluit de buis af en draai hem zachtjes totdat de oplossing goed is gemengd.

Breng 1 ml van de oplossing in de "10 ^ -3" -testbuis over in een "10 ^ -4" -slang met een nieuwe pipet. Sluit de "10 ^ -4" buis af en draai om te mixen. Herhaal deze methode om de oplossing van de "10 ^ -4" -buis over te brengen naar de "10 ^ -5" -buis en vervolgens van de "10 ^ -5" -buis naar de "10 ^ -6" -buis.

Plaat drie monsters elk van de "10 ^ -4", "10 ^ -5" en "10 ^ -6" buizen. Gebruik een nieuwe pipet om 1 ml oplossing uit de buis in een Petri-plaat over te brengen. Voeg ongeveer 15 ml voedingsagar aan de plaat toe; plaats vervolgens het deksel op de plaat en draai zachtjes zodat de agar de onderkant van de plaat bedekt. ​​

Maak een controleplaat door 1 ml gedestilleerd water in een petrischaal te plaatsen met behulp van een nieuwe pipet. Agar toevoegen; zet het deksel op en draai de plaat.

Laat de petrischalen rechtop staan ​​tot de agar is gezet. Keer vervolgens de platen om en incubeer ze - hetzij in een incubator of bij kamertemperatuur - gedurende slechts 24 uur en maximaal vijf dagen.

Verwijder de platen uit de incubator na de gewenste incubatietijd. Tel de bacteriekolonies op platen met ongeveer 30 tot 300 kolonies. Gebruik een permanente markering om de kolonies te markeren die u al hebt geteld om te voorkomen dat dezelfde kolonies tweemaal worden geteld.

Deel het aantal kolonies dat is geteld door de verdunning - "10 ^ -4", "10 ^ -5 "of" 10 ^ -6 "van de bodemoplossing voor elke plaat. Vind het aantal bebouwbare bacteriën in de oorspronkelijke gram grond door het gemiddelde te nemen van de resultaten van elke telbare plaat.

TL; DR (te lang; niet gelezen)

Volg aseptische laboratoriumtechnieken overal de procedure.

Waarschuwing

Zorg dat u alle Petri-platen, grondoplossingen en pipetten op de juiste manier verwijdert van besmetting en mogelijke infectie door bacteriën.

Alleen deze procedure meetbaar bebouwbare bacteriën. Volgens de Cornell University groeit tussen 90 en 99 procent van de bodembacteriën niet op voedingsagar.