Vmax is geen drempel voor de substraatconcentratie voor het initiëren van een enzymatische reactie. Vmax is de maximale reactiesnelheid die een enzym kan bereiken als het verzadigd is met substraat. Op dit punt zijn alle actieve plaatsen van het enzym bezet met substraatmoleculen en verloopt de reactie met de snelst mogelijke snelheid. Het verhogen van de substraatconcentratie voorbij dit punt zal de reactiesnelheid niet verhogen, omdat alle actieve plaatsen van het enzym al verzadigd zijn.

De drempel van de substraatconcentratie voor het initiëren van een enzymatische reactie staat bekend als de Michaelis-constante, of Km. Dit is de substraatconcentratie waarbij de reactiesnelheid de helft is van de Vmax. Op dit punt is de helft van de actieve plaatsen van het enzym bezet met substraatmoleculen en verloopt de reactie met de helft van de maximaal mogelijke snelheid. Het verhogen van de substraatconcentratie boven de Km zal de reactiesnelheid verhogen, maar de Vmax zal pas worden bereikt als alle actieve plaatsen van het enzym verzadigd zijn.

De Km is een belangrijke parameter voor het begrijpen van de kinetiek van enzymatische reacties. Het kan worden gebruikt om de affiniteit van een enzym voor zijn substraat te bepalen, en het kan ook worden gebruikt om de snelheid van een enzymatische reactie bij een gegeven substraatconcentratie te berekenen.